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保藏菌种的方法有哪些 保藏菌种的方法有哪些图片

保藏菌种的方法有哪些?

保存方法:

(一)培养基保存法

利用各种斜面和半固体培养基,加上石蜡油保存菌种,是一种最常用而又简易的保存方法。

1.普通琼脂斜面保存法:肠道杆菌、葡萄球菌等一般细菌可接种于不含糖的普通琼脂斜面上,斜面底部应加少许无糖肉膏汤,以防干涸。经35℃培养18~24h后,移种于4℃冰箱中,一般可保存一个月,每月传代一次。

2.血液琼脂斜面保存法:链球菌、肺炎链球菌应接种于血液琼脂斜面上,35℃培养生长后,置4℃冰箱中保存,链球菌须半个月至1个月移种一次,肺炎链球菌的新分离菌株须2~4天移种一次,以后逐渐延长移种时间,在适应后可延至半个月移种一次。

3.巧克力色斜面保存法:宜保存脑膜炎奈瑟菌,并在35℃孵箱中保存,一般每2天移种一次。

4.鸡蛋斜面保存法:适于保存含有Vi抗原的沙门菌属及其他含表面抗原的细菌,一般可保存一个月。

5.半固体穿刺保存法:将细菌接种于琼脂半固体或血清琼脂半固体内,经35℃培养18~24h,再以无菌方法加入灭菌的液体石蜡。高度约lcm,置4℃冰箱保存。保存时间可达3~6个月。

(二)干燥保存法

原理是将细菌体内的水分蒸发掉,使其处于休眠和代谢停滞状态,从而达到长期保存菌种的目的医|学教|育网搜集整理。菌种干燥后低温保存,可保存数年至十几年。

(三)冷冻干燥保存法

本法又称冷冻真空干燥法。它综合利用了各种有利于菌种保存的因素(低温、干燥和缺氧等),是目前最有效的菌种保存方法之一。用本法保存的菌种具有成活率高,变异性小等优点,保存期一般3~5年,有的可长达10年以上。

临时保存菌种的方法高中生物?

1、传代培养保藏法:包括又有斜面培养、穿刺培养、疱肉培养基培养等,培养后于4-6℃冰箱内保存。

2、液体石蜡覆盖保藏法:液体石蜡覆盖保藏法是传代培养的变相方法,能够适当延长保藏时间。

3、载体保藏法:载体保藏法是将微生物吸附在适当的载体,如土壤、沙子、硅胶、滤纸上,而后进行干燥的保藏法。

4、寄主保藏法:寄主保藏法用于目前尚不能在人工培养基上生长的微生物。

5、冷冻干燥保藏法:先使微生物在极低温度(-70℃左右)下快速冷冻,然后在减压下利用升华现象除去水分(真空干燥),其中真空冷冻干燥法最常见。

菌种保藏的原理:

菌种保藏有多种方法,其原理大多大同小异,主要是运用一些方式尽量降低生物体内的代谢,达到延长生命,减少变异的目的。通常采用的方法为低温、缺氧、干燥。

低温主要对菌种产生两方面的影响,首先,较低的温度可以减缓机体细胞的酶活,降低新陈代谢,达到保藏菌种的目的。其次,低温同时会导致菌体诱发菌丝自溶机制,如果降温过程失误,同样会造成机体的机械损伤和溶质损伤。

食用菌菌种保存最常用的方法?

斜面低温保存法

这是最简便最普通的保存方法。即将菌丝生长良好的斜面菌种,置于冰箱内;在4℃左右低温下保存;以后每隔2~3个月转管移接一次。这种保存方法适于大多数食用菌菌种。

为了延长保存时间,试管口处要用塑料薄膜包扎,以防培养基干固。在农村没有冰箱设备的,可把母种试管,用石蜡封口,再用塑料薄膜包封,沉放于清凉的井底保存。

2.液体石蜡保存法

食用菌的菌丝体都可用此法保存,方法简单,只在斜面菌种试管内,注入一层已灭过菌的液体石蜡,注入量以高出斜面1厘米为宜,使菌种与空气隔绝,降低其新陈代谢的活动,然后在棉塞外包以塑料薄膜,直立存放于室内干燥处或低温下保存,一般可保存一年以上。

使用液体石蜡菌种时,只要用接种计从斜面上挑取少许菌体,放在新鲜的培养基上;经过培养,即可应用。原种则重新蜡封,继续保存。

将菌种保藏方法和结果?

目前菌种保藏的方法很多,一般种植户和生产厂家多采用0-4℃低温冰箱保藏,优点是随时可以拿出使用,缺点是长时间保藏菌种老化需转管活化;其他的保藏方法为液氮低温保藏、液体石蜡保藏、沙土管保藏方法等虽能长时间保藏菌种,但技术要求严格,且需要专业的人员负责。

长期保存菌种的方法?

液体石蜡保存法

液体石蜡保存法就是在斜面菌种或穿刺菌种表面覆盖一层液体石蜡,从而隔绝空气,减少菌种及培养物水分挥发,保藏温度要求在4℃下即可。

将培养好的菌种斜面,缓慢倒入无菌的液体石蜡,使石蜡高出斜面顶端1厘米,直立放置,低温保存就可以,霉菌、放线菌、芽孢细菌可保藏2年以上不死,酵母菌可保藏1-2年。

沙土保存法

沙土保藏法是将菌种吸附在适当的载体上,而后进行干燥的保藏。将培养好的菌种接入沙土管内,用真空泵抽气至干。细菌、酵母菌、丝状真菌均可用此法保藏,前两者可保藏2年左右,有些丝状真菌甚至可保藏14-17年之久。

甘油管保存法

甘油管保存是利用微生物在甘油中生长和代谢受到抑制的原理达到保藏目的。配置30%浓度的无菌甘油,将培养好的菌种与甘油充分混合均匀,放入-20℃保存。

冷冻干燥保藏法

冷冻干燥保存法就是将菌种与保护剂混合均匀后,快速冷冻,然后在减压下利用升华现象除去水分,兼具低温、干燥、除氧三方。干燥后的菌种在真空环境下可长期保存。

保存菌种的两种方法高中生物?

常用保藏菌种的方法有以下几种:

(1)斜面低温保藏法这是最简单最普通的保藏方法。首先将菌种在适宜的斜面培养基(一般PDA)上培养成熟后,选择菌丝生长粗壮,边缘保存。一般保存温度4~6℃,除草菇和银耳菌种外(10~15℃),此方法对其他食用菌都适宜,一般菌种可保藏2~4个月,所以需定时移接。此法保藏虽然方便,但是保藏时间短,需经常转管,也很容易发生衰退变异现象。因此,不能用作长期保藏,最好与其他方法结合起来保藏。

另外,为了减少保藏期间培养基水分蒸发,琼脂最好加到2.5%。为防止菌种在保藏过程中产酸分的积累,应加入0.2%的磷酸氢二钾、磷酸二氢钾等缓冲盐类,同时,培养成熟后,最好将棉塞管口外剪平,并用矿蜡封或换以无菌木塞,这样做也可以减少培养基水分的散失,延长保存时间。

在农村如果没有冰箱,可采用土法保藏。即把保藏用的斜面菌种换上无菌橡皮塞,并用矿烛蜡封后密闭的广口瓶中,悬入井底保藏。(2)贮藏室保藏法原种和栽培种一般只在贮藏室短期保藏,贮藏室温度0~10℃为好。室内应清洁、干燥、无光,应经常检查温度和湿度,以降低其生活力,减少变异退化,防止杂菌污染,避免过早出菇。温度越高,保存的时间越短。

微生物菌种保藏方法?

1、传代保藏 传代保藏菌种是微生物保存中最常用的方法之一。很多微生物在低温或者干燥处理时,会很快死亡,为了保存菌种的活性,就要定期不断的进行菌种转接、培养后再保存。

2、斜面低温保藏 将待保藏的菌种接种在合适的斜面培养基上,在相应的条件下培养至得到充足的菌体或者孢子,随后密封试管置于4℃左右保存,具体保存温度按照保存菌种设定。保藏时间依微生物的种类从1个月到4个月不等。

3、冷冻干燥保藏 冷冻干燥保藏法为菌种保藏方法中最有效的方法之一,对一般生活力强的微生物及其孢子以及无芽胞菌都适用,这种方法适用于菌种长期保存,一般可保存数年至十余年。我国大多数生物制品菌种都是采用该法保藏。

4、半固体穿刺保藏 配制半固体培养基,高压湿热灭菌后倒于无菌试管中至约1/3,待培养基凝固,用接种环从平面培养基上挑取单菌落,穿入培养基若干次。在合适的条件下进行培养至菌体旺盛生长,之后密封试管,根据菌种特点在4 ℃左右或者凉爽干燥处保存。保存时间至少可以达到1 年,对于有些菌种甚至能达到20 年之久。

5、液氮超低温保藏 液氮超低温保藏法是菌种长期保藏的最有效最可靠的方法。液超低温保藏法是把菌种装在含有冷冻保护剂的安瓶瓶内,将该安瓶瓶放人液氮(-196℃)中保藏。

6、冷冻真空干燥保藏 将处于成熟期的微生物培养物悬浮于无菌的血清、卵白、脱脂奶或者海藻糖等保护剂中制成浓菌液,分装到无菌的安瓿瓶中,于低温冰箱中冷冻,达到预定温度后对浓菌液进行冷冻干燥处理,之后在真空状态下融封安瓿瓶,于20 ℃保藏。

7、蒸馏水保藏 蒸馏水保藏菌种的方法普遍的应用于医学微生物、食品微生物和工业微生物中。将菌体悬浮于蒸馏水中,即可在室温下保存数年,此法应注意避免水分的蒸发。

常用的菌种保藏方法有哪些?

菌种保存的方法有斜面低温保藏法、液体石蜡覆盖保藏法、沙土保藏法、滤纸保藏法、甘油管保存法、冷冻干燥保存法。1、斜面低温保藏法:将菌种接种到适合的固体斜面培养基上,用油纸将棉塞部分包扎好,然后转移至2-8℃的冰箱中进行保存。2、液体石蜡覆盖保藏法:使用液体石蜡将斜面菌覆盖住,使其和空气隔绝。

一、菌种保存的方法有哪些

1、斜面低温保藏法

(1)将菌种接种到适合的固体斜面培养基上,等到菌种充分生长过后,使用油纸将棉塞部分包扎好,然后转移至2-8℃的冰箱中进行保存。

(2)如果是霉菌、放线菌及有芽孢的细菌,一般可以保存2-4个月左右,需要移种一次。如果是酵母菌,一般可以保存2个月左右,需要每个月移种一次。

2、液体石蜡覆盖保藏法

(1)将液体石蜡装在三角烧瓶中,并使用棉塞塞好,用牛皮纸进行包扎,然后在0.1MPa,121.3℃的环境下灭菌30分钟左右,接着将其放置在40℃的温箱之中,将水汽蒸发掉。

(2)将需要保藏的菌种,用适合的斜面培养基进行培养,得到健壮的孢子或者是菌体。

(3)使用灭菌过的吸管将液体石蜡吸出,注入斜面上,用量为高出斜面顶端1cm左右为宜。

(4)将试管直立,放置在低温或者是室温之下进行保存。

(5)霉菌、放线菌、芽孢细菌可以保藏2年以上不死,酵母菌可以保藏1-2年,一般无芽孢细菌可以保藏1年,脑膜炎球菌可以保藏3个月左右(37℃环境下)。

3、沙土保藏法

(1)准备好河沙,加入10%稀盐酸,然后加热煮沸30分钟左右,将里面的有机质去掉,然后将酸水倒掉,用自来冲洗至ph为中性,接着烘干,过筛(40目筛子),去掉粗颗粒。

(2)准备好非耕作层的不含腐植质的瘦黄土或红土,浸泡洗涤数次,直至ph为中性,然后烘干,碾碎,过筛(100目筛子),去掉粗颗粒。

(3)将沙和土按照2:1的比例混合,装入试管或者是安瓿管中,塞好棉塞,在1212℃的环境下灭菌30分钟左右。

(4)将菌种在斜面培养基中培养,得到健壮的菌体,然后向斜面培养物中注入3-5ml无菌水,洗下细胞或孢子制成菌悬液。

(5)使用灭菌过的吸管吸取菌悬液,然后均匀滴入沙土管中(0.2-0.5ml/管)。如果是放线菌或霉菌,可以直接挑取孢子拌入沙土管中。

(6)真空抽去沙土管中的水分。

(7)将沙土管用火焰熔封,然后存放在低温(4-6℃)干燥处保藏,或者是将沙土管用牛皮纸或塑料纸包好,放置在干燥器内保存。


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